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ELISA試劑盒方法類型與操作步驟對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響
更新時(shí)間:2016-12-26   點(diǎn)擊次數(shù):1476次

ELISA試劑盒中通常有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶物,加底物。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在ELISA試劑盒板孔的底部,防止加在孔壁上部,并留意不行濺起,不行發(fā)作氣泡。加標(biāo)本通常用微量加樣器,按規(guī)則的量參加板孔中。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴,以發(fā)作穿插污染,也可用一次性的定量塑料管加樣。
有此測(cè)定(如間接法ELISA)需用稀的血清,可在試管中按規(guī)則的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中參加稀釋液,再在其參加血清標(biāo)本,然后在微型震動(dòng)器上震動(dòng)1分鐘以保證混和。加酶物使用液和底物用液時(shí)可用定量多道加液器,使加液進(jìn)程迅速完結(jié)。在雙抗體夾心法測(cè)定抗原時(shí),如使用對(duì)于抗原分子上兩個(gè)不一樣抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相抗體和酶標(biāo)抗體。
ELISA試劑盒則在測(cè)守時(shí)可使標(biāo)本的參加和酶標(biāo)抗體的參加兩步并作一步。這種雙位點(diǎn)一步不光簡(jiǎn)化了操作,縮短了反應(yīng)時(shí)間,如使用高親和力的單克隆抗體,測(cè)定的敏感性和特異性也明顯進(jìn)步。單克隆抗體的使用使測(cè)定抗原的ELISA試劑盒進(jìn)步到新水平。

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